由于室內空氣的氧含量接近21%，研究人員經常報告他們的室內的細胞培養箱也是如此。然而，如果你仔細想一想，就會意識到這是不可能的。

我們在傳統的開放式細胞培養箱中加入CO2，將其升高至5%或更高，以保持基于碳酸鹽緩沖液的細胞培養基的pH。室內空氣中的二氧化碳含量為0.04 - 0.06%（如果通風不良，有時會多一點）。每次打開和關閉內部培養箱門時，都會補充二氧化碳氣體，以彌補二氧化碳培養箱內部的損失。這必然會降低培養箱中氧氣的百分比。

高濕度也會降低培養箱中的氧氣含量，因為在帶有開放式水盆的培養箱中，水蒸氣可以占氣體體積的8%左右。我們有高氧氣應用的客戶向我們報告說，在5%二氧化碳和開放水源的情況下，他們無法將氧氣含量提高到87%以上。

為了測量生物醫學領域的細胞培養箱中的實際氧含量，我們配合培養箱廠商在二氧化碳培養箱的基礎上增加了一個氧化鋯氧氣傳感器，在其他實驗室中四處測量氧含量。我們在標準房間空氣環境下，打開了控制值為5% CO2的恒溫二氧化碳培養箱的內門，開放式水盆也運行的剛好足夠長，可以在輕輕關門之前將傳感器放在架子上。

我們發現氧含量穩定在平均17.2+/-0.3%

我們將培養箱周圍的處理室設置為室內空氣條件（21%O2和0.05%CO2），并將培養箱設置為21%O2、5%CO2，并配有開放式儲水槽。然后，當我們打開門，取出T75燒瓶并關閉箱門時，我們關閉了氧氣控制并觀察了對大型（12”x 14”x 22”）培養箱中氧氣水平的影響。我們在20分鐘后更換燒瓶，模擬正常的室內空氣培養箱使用。

這是我們記錄的內容：

可以預見，開門會導致二氧化碳含量下降。一旦關閉，培養箱就會注入二氧化碳，使其恢復到5%，從而使內部的氧氣含量下降，接近我們在室內空氣培養箱中看到的17%。培養箱的內部容積和開門事件的頻率改變了氧氣擺動的幅度。我們發現的不穩定的條件是小保溫箱（12'x 14'x 10“）和更頻繁的開門事件。

由于所有細胞都會對環境條件做出反應，因此結果可能會有所不同。如果你不控制細胞的氧氣濃度，無論是在培養箱中還是在處理細胞的過程中，你可能需要仔細考慮你在實驗中引入了什么變量。確實有技術可以清理這些氧的波動。

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