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微流控芯片表面修飾方法

聚二甲基硅氧燒片是目前國(guó)內(nèi)外研究最多、應(yīng)用最廣的一類高分子聚合物芯片。微流體晶片表面問(wèn)題復(fù)雜。第一,表面疏水性很高,未處理表面水的接觸角大于度,清洗片與電泳分離時(shí),微通道中極易出現(xiàn)氣泡,第二,該芯片的導(dǎo)熱性較差,比玻璃晶片低約五到六倍的導(dǎo)熱性,對(duì)焦耳熱有效散發(fā)極為不利,高分散場(chǎng)的應(yīng)用受到很大限制,再者,微流控芯片是多孔的,被吸附的疏水小分子如其動(dòng)力學(xué)直徑小于芯片微孔直徑,晶片內(nèi)部將會(huì)擴(kuò)散、遷移,這不僅會(huì)導(dǎo)致試樣丟失,還會(huì)引起芯片本身的溶脹性、晶片表面的扭曲和微孔變形;晶片表面是動(dòng)態(tài)變化的,由于晶片上的分子沒(méi)有完全共價(jià)交聯(lián),所以分子具有一定的自由度,靠近表面的分子就能改變其分子構(gòu)象,晶片內(nèi)的自由分子能遷移到晶片表面,經(jīng)過(guò)表面修飾后的親水性表面能自動(dòng)恢復(fù)其親水性,從而大大限制了晶片的使用時(shí)間和穩(wěn)定性。

在芯片實(shí)驗(yàn)中減少了重復(fù)性。PDMS晶片的復(fù)雜表面特性,近年來(lái)已成為限制其廣泛應(yīng)用的主要因素。一直以來(lái),我們都在努力研究PDMS表面特性和表面修飾,尋找一種綠色、簡(jiǎn)便、高效的PDMS表面修飾技術(shù),來(lái)構(gòu)建抗生物污染的PDMS芯片。從而可以逐步解決這些問(wèn)題,從而進(jìn)一步改善PDMS的表面性能,擴(kuò)大PDMS芯片的應(yīng)用范圍。下面是最近幾年對(duì)PDMS微芯片進(jìn)行表面修飾的研究進(jìn)展。

PDMS微流控芯片表面修飾方法主要有高能氧化技術(shù)、動(dòng)態(tài)修飾技術(shù)、本體修飾技術(shù)、溶膠一凝膠技術(shù)、層疊組裝修飾、化學(xué)氣相沉積、表面共價(jià)嫁接技術(shù)等。

1、高能量氧化工藝。

Lee等人利用氧等離子體對(duì)PDMS晶片表面進(jìn)行處理,使其表面形成帶負(fù)電的基團(tuán),然后對(duì)PDMS表面進(jìn)行靜電改性,從而有效地抑制PDMS表面蛋白的非特異性吸附。Pruden等人利用氨等離子體對(duì)PDMS晶片表面進(jìn)行處理,通過(guò)控制處理時(shí)間、溫度及等離子體強(qiáng)度,使PDMS晶片表面、氨基及亞胺基功能化。

2、動(dòng)態(tài)修整。

Ocvirk等人通過(guò)改變PDMS芯片微通道上對(duì)四丁基氯化氨(TBAC1)和十二烷基硫酸鈉(SDS)進(jìn)行修飾,以改變其表面電勢(shì),從而有效控制電滲。對(duì)非離子型表面活性劑Tween-20對(duì)PDMS芯片微通道進(jìn)行動(dòng)態(tài)修飾。因?yàn)門ween-20分子內(nèi)部的疏水鏈可以通過(guò)疏水作用來(lái)固定在PDMS芯片的微通道表面,而其分子中的P氧乙烯鏈部分可形成親水性的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)排布,該方法能較好地抑制電滲流,同時(shí)還能有效地抑制芯片微通道上氨基酸的非特異性吸附,實(shí)現(xiàn)四個(gè)氨基酸的高效、快速分離。

3,本體修整。

Luo等人將碳煉酸(UDA)作為添加劑與液體PDMS混合固化,從而制備出本體修飾的PDMS芯片,提高分析物的分離效率,并改善峰展。在PDMS芯片制造過(guò)程中,肖艷等將聚乳酸一聚乙二醇作為添加劑加入到PDMS芯片預(yù)聚體中,實(shí)現(xiàn)了摻雜改性。研究發(fā)現(xiàn),本體修飾的PDMS芯片表面EOF和接觸角均有下降,能有效地抑制PDMS蛋白的非特異性吸附,并成功地用于兩種氨基酸的有效分離。

4溶膠單凝膠工藝。

Bertson和ROrTlari使用金屬溶膠一凝膠法修飾PDMS芯片表面,其過(guò)程如下:金屬醇鹽(異丙醇),異丙醇鉻,三異丁釩氧合成氨)是通過(guò)水蒸氣擴(kuò)散和修飾PDMS晶片通道表面,經(jīng)水解形成穩(wěn)定的金屬氧化物。并且在整個(gè)PDMS芯片中均勻分布,不產(chǎn)生任何化學(xué)反應(yīng),從而大大提高了PDMS芯片微通道表面的親水性。

5層層疊組裝修飾。

Chen等人利用溶菌酶一牛血清白蛋白膜對(duì)PDMS芯片進(jìn)行多次組裝修飾,使EOF的穩(wěn)定性得到提高,實(shí)現(xiàn)了環(huán)境污染苯二胺、氨酚類、神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺和腎上腺素的有效分離。Wang在PDMS芯片微通道中對(duì)聚二烯丙基二甲基氯和聚4一苯乙烯酸鈉鹽進(jìn)行了有效的分離,并對(duì)其進(jìn)行了有效的分離。

6.化學(xué)氣相淀積法。

Moorcroft研究,PDMS晶片經(jīng)過(guò)臭氧或紫外光處理,再通過(guò)氣相沉積技術(shù)在處理后的晶片表面沉積SiO2,以實(shí)現(xiàn)微量DNA序列的檢測(cè)。另外,Larger等人將聚五氟苯酚和對(duì)位二甲基苯氣相沉積在PDMS芯片表面,實(shí)現(xiàn)了對(duì)細(xì)胞的捕捉,并有效地抑制了羅丹明B在晶片表面的非特異性吸附。

7表面共價(jià)嫁接。

Hu等人在PDMS芯片微通道上嫁接了丙烯酸、酞胺、二甲基酞、聚(乙烯基乙二醇)丙烯酸酯和聚(乙烯基乙二醇)甲氧基丙烯酸脂等,使晶片通道表面變得親水性,并保持30小時(shí)左右。Tseng等通過(guò)使用H20:的氧化反應(yīng)和硅烷化處理PDMS芯片表面,可以成功地修飾具有氨基的PVA。聚乙烯醇修飾的PDMS芯片表面具有長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定性,可以應(yīng)用于生物分子的固定,抑制蛋白的非特異性吸附。

8微珠修飾技術(shù)

陳等人提出了一種在PDMS晶片微通道中修飾硅顆粒的新方法,這種微粒可以將酶、蛋白質(zhì)等生物大分子固定在晶片通道表面,使之集成和系統(tǒng)研究。

近年來(lái),國(guó)內(nèi)外對(duì)PDMS表面修飾的研究較多,但各種修飾方法各有其優(yōu)缺點(diǎn),例如,動(dòng)態(tài)修飾技術(shù)可以簡(jiǎn)便、快速地減少分析物在PDMS微道表面的非特異性吸附。

附加,但這種動(dòng)態(tài)修飾層在電泳分離時(shí)會(huì)出現(xiàn)一些損失,因而穩(wěn)定性較差。盡管化學(xué)共價(jià)修飾可以改善修飾層的穩(wěn)定性,但是,在修飾過(guò)程中往往很繁瑣,有些需要很長(zhǎng)時(shí)間。

之間,有些需要使用有機(jī)或有毒試劑,由于PDMS芯片易溶于有機(jī)試劑,造成微通道的扭曲變形,因此大大限制了其在生化分析中的應(yīng)用范圍。



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