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新型微流控器件實(shí)現(xiàn)目標(biāo)細(xì)胞自動(dòng)雙重提取和純化

       美國俄亥俄州辛辛那提大學(xué)的一支研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一款新型微流控器件,利用微型腔體產(chǎn)生的微漩渦和流體的慣性作用,同時(shí)實(shí)現(xiàn)微量目標(biāo)細(xì)胞的雙重分選以及背景細(xì)胞的去除。對于細(xì)胞生物學(xué)研究和臨床診斷,從復(fù)雜細(xì)胞樣本里分離和純化目標(biāo)細(xì)胞是非常關(guān)鍵的樣本制備步驟。當(dāng)細(xì)胞樣本中的微量目標(biāo)細(xì)胞和大量背景細(xì)胞的含量存在數(shù)量級差異時(shí),微量目標(biāo)細(xì)胞的分離純化的難度會(huì)更大,因?yàn)檫@不僅需要有效地提取目標(biāo)細(xì)胞,還同時(shí)要求能夠高效地去除背景細(xì)胞。該研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)的微流控器件通過雙重提取和純化攻克了這一技術(shù)難題,該微流控器件能夠連續(xù)、自動(dòng)地將較大的目標(biāo)細(xì)胞從背景細(xì)胞中分離出來。該研究成果將發(fā)表于近期的《TECHNOLOGY》雜志。


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       利用該新型微流控器件從人體血液中分離純化人類腫瘤干細(xì)胞(human cancer stem-like cells, HuSLCs)。(a)微流控器件;(b)顯微明場照片顯示,利用兩個(gè)微型漩渦腔室從人體紅血細(xì)胞中雙重分離純化人類腫瘤干細(xì)胞;(c)顯微明場照片顯示,未分選的細(xì)胞樣本(inlet),細(xì)胞分選后的照片(出口 O1、O2、O3),表明從出口3成功獲得了純化的人類腫瘤干細(xì)胞(O3)。


       “我們的微流控器件無需細(xì)胞標(biāo)記,基于細(xì)胞尺寸即可連續(xù)、自動(dòng)地進(jìn)行細(xì)胞分選。該器件的特點(diǎn)是能夠分離提取尺寸較大的目標(biāo)細(xì)胞,同時(shí)去除幾乎所有的非目標(biāo)細(xì)胞,獲得高純度的目標(biāo)細(xì)胞。純化后的細(xì)胞樣本有利于下游生物醫(yī)學(xué)研究及診斷?!毙列聊翘岽髮W(xué)教授及該論文的研究負(fù)責(zé)人Ian Papautsky教授說。


       盡管之前的微流控器件分選細(xì)胞的效率也能達(dá)到95%以上,但如果細(xì)胞樣本中非目標(biāo)細(xì)胞的含量高于目標(biāo)細(xì)胞幾個(gè)數(shù)量級的話,利用之前的微流控器件常常無法獲得高純度的目標(biāo)細(xì)胞。本課題提出了一種基于微型漩渦的慣性微流控芯片,能夠高效的進(jìn)行連續(xù)雙重分選和純化,獲得高純度的生物微粒。該器件利用微流道中流體的慣性作用,將快速流動(dòng)的細(xì)胞進(jìn)行高度有序的排列。接下來,第一對微型腔體產(chǎn)生了微型漩渦,細(xì)胞通過這些漩渦時(shí),尺寸較大的目標(biāo)細(xì)胞將從微型腔體的兩個(gè)角落的出口提取出來,尺寸較小的背景細(xì)胞則從中間出口排出。為進(jìn)一步有效分離殘留的背景細(xì)胞,從微型腔體的兩個(gè)角落的出口提取出來細(xì)胞樣本將再次進(jìn)入第二對微型腔體,實(shí)現(xiàn)雙重細(xì)胞分選功能,由此獲得高純度的目標(biāo)細(xì)胞樣本。為了證實(shí)其可行性,研究人員將少量的人類腫瘤干細(xì)胞添加到人體血液中進(jìn)行試驗(yàn),該微流控器件成功地分離出了人類腫瘤干細(xì)胞,去除了99.97%的非目標(biāo)人體紅血細(xì)胞。


       “這種雙重分選和純化細(xì)胞的功能絕無僅有,但這還不是這款微流控器件唯一閃光的地方,”該論文第一作者Xiao Wang博士說,“細(xì)胞樣本中的細(xì)胞尺寸各異,因此,保持器件性能的關(guān)鍵是靈活地調(diào)整分選和純化的臨界值。對于如今大部分的微流控器件,分選臨界值的調(diào)整是通過器件的重新設(shè)計(jì)和重新制造來實(shí)現(xiàn)的。這將需要更長的開發(fā)時(shí)間、更高的成本,也可能會(huì)導(dǎo)致對時(shí)間敏感的生物樣本的處理延遲。但對于我們的微流控器件來說,我們只需要通過簡單地改變流體流速或者調(diào)整流體阻力,即可調(diào)整分選臨界值,而無需對器件進(jìn)行重新設(shè)計(jì)或重新制造。




標(biāo)簽:   微流控 微流控芯片 微流控器件 細(xì)胞分選
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